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        MutUFO? Fast Mutagenesis Kit——快速定点突变试剂盒

        首页    MutUFO? Fast Mutagenesis Kit——快速定点突变试剂盒

         

        MutUFO™

        Fast Mutagenesis Kit

         

         

        产品简介

        MutUFO™Fast Mutagenesis Kit是基于CloneUFO™快速克隆技术的定点突变系统。使用本试剂盒,目标质粒扩增产物经胶回收或DpnI消化、CloneUFO重组环化后直接进行转化即可完成定点突变。该试剂盒由两个??樽槌桑篜roofast™ Super-Fidelity DNA Polymerase扩增??楹虲loneUFO快速克隆???。 

        Proofast超高的保真度显著降低了扩增过程中引入新突变的可能性,由于模板使用量极低,有利于原始甲基化模板的彻底降解。其卓越的长片段扩增能力,广泛适用于长度小于20 kb的任何质粒扩增。CloneUFO™快速克隆系统利用高效的同源重组反应,使得MutUFO™定点突变试剂盒进行DNA定点突变时,线性化PCR产物能够高效环化,利于转化宿主,提高突变效率。 

        完美优化的反应缓冲液、快捷的操作流程以及优异的定点突变效率,使得MutUFO™ Fast MutagenesisKit成为DNA定点突变首选试剂盒。

         

        产品组成

        组分

        货号

        20 rxn

        Proofast  Max Super-Fidelity DNA Polymerase

        P202-A

        40 μL

        2ⅹProofast Max Buffer

        P202-B

        1 mL

        UvsXase™

        C101-A

        40 μL

        5ⅹUFO Buffer

        C101-B

        250 μL

         

        储存条件

        -20°C保存。

         

        实验流程

        1)引物设计

        向质粒引入单碱基或连接多碱基定点突变,只需设计一对引物将质粒进行反向PCR扩增即可。引物设计原则为:正反向扩增引物5’端包含15-21 bp反向互补区域(GC含量40%-60%为佳),各引物非互补区域长度至少为15 bp(待突变位点至引物3’端区域Tm值高于60℃为佳)。

        注意:计算引物Tm值时,应计算待突变位点至引物3' 端这一区域内的碱基,调整引物长度使这一段Tm值高于60℃,待突变位点至引物5' 端区域内的碱基不应参与计算。

        2)突变质粒扩增

        请选用Proofast™ Max Super-Fidelity DNA Polymerase扩增长片段质粒,详细操作参见:Proofast™ 超高保真聚合酶说明书

        3)扩增产物胶回收或DpnI消化,去除模板

        4)进行重组反应

        5)反应产物转化、涂板、克隆鉴定

         

         

        详细操作参见:

        Proofast™ 超高保真聚合酶说明书

        CloneUFO™ 快速克隆试剂盒说明书

         

        2019年7月12日 09:22
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