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        ATGStarttaqPlus

        ATGStart? Taq Plus DNA Polymerase(P302)

        ATGStart TM Taq Plus DNA Polymerase

        P302

         

         

        Product Manual

         

        产品简介

        ATGStart TM Taq Plus DNA Polymerase是在ATGStartTM Taq DNA Polymerase基础上进行饱和定点突变获得稳定性、行进性以及灵敏度提高的化学修饰Taq DNA Polymerase,在室温下活性被完全封闭,可防止在样品准备及反应升温阶段产生非特异扩增和引物二聚体。只有经过95°C加热后活性才被释放。与基于抗体的热启动Taq酶相比,ATGStart Taq Plus DNA Polymerase活性封闭更彻底,严谨性更高;与现有化学修饰的热启动Taq酶相比,ATGStart Taq Plus DNA Polymerase的激活时间只需要5分钟,兼容现有的PCR程序。ATGStart Taq DNA Polymerase配合优化的缓冲体系,可最大程度的减少非特异扩增和引物二聚体,带来最高的灵敏度,非常适合于从复杂模板(基因组,cDNA)中扩增低拷贝基因。PCR产物的3’端带A,可克隆至T载体,并适用于本公司CloneUFO快速克隆试剂盒。

         

        产品组成

        P302250U

        5ATGStartTM Plus Buffer (Mg2+)

        1 ml

        ATGStart Taq Plus DNA Polymerase (2.5 U/μl)

        100 μl

        dNTP Mix (10 mM each)

        200 μl

         

        储存条件

        -20°C保存。

         

        1. 反应体系配制

        ddH2 O

        to50 μl

        5 × ATGStartTM Plus Buffer (Mg 2+ plus)

        10 μl

        25 mM MgSO4 *1

        optional

        dNTP Mix (10 mM each)

        1 μl

        5 × PCR Enhancer *2

        optional

        模板DNA 

        optional

        引物1(10 μM)

        2 μl

        引物2(10 μM)

        2 μl

        ATGStartTM Taq Plus DNA Polymerase (2.5 U/ μl) *3

        1 μl

        *1. 对于大多数PCR反应,Mg2+ 最佳终浓度为1.5-2 mM。体系中已含有终浓度为2 mMMg2+ ,如有需要,可用25 mM MgCl2 0.2-0.5 mM为间隔向上摸索Mg2+ 最佳使用浓度。

        *2. 推荐仅当扩增片段GC含量> 60%且优化条件也无法正常扩增时使用;可能会降低保真度。

        *3. 酶量可在0.5-1.5 μl之间调整。加大酶量在通常情况下可以提高扩增产量,但有可能会使特异性下降。

         

        2. PCR反应条件设置

        95°C

        5~10 min *1 (预变性)

         

         

        95°C

        30

        30-35 cycles

         

        55°C *2

        30 sec

        72°C

        60 sec/kb

        72°C

        7 min(彻底延伸)

         

         

                 

        *1. 预变性时间至少需要5 min。如扩增不理想,可适当延长95℃预变性时间,最长可至10 min。

        *2. 退火温度需要根据引物退火温度调整,一般设置成低于引物退火温度1-2℃即可。

         

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