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        BL21

        BL21(DE3)化学感受态细胞(CC101)

        货号 规格 价格
        CC101 100 μl × 10支 200
        100 μl × 20支 380

        1.产品介绍

        本品为使用大肠杆菌BL21 (DE3) 菌株制备的化学转化超级感受态细胞,转化效率超过107 cfu/μg pUC19 DNA。适用于T7 启动子系统的表达载体( 如pET 系列),基因型F-ompThsdS(rB-mB-) galdcm (DE3)。

        2.产品组成

        Item Vol Transformation Efficiency
        BL21(DE3)Competent Cell 100 μl 1 × 108 cfu/μg

        3.贮藏条件

        本产品应置于-80℃储存,勿置于-20℃或液氮中保存

        4.产品特性

        - BL21 (DE3) 品系,以T7 RNA 聚合酶为表达系统的高效蛋白表达宿主。

        - T7噬菌体RNA聚合酶位于噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。

        - 适合非毒性蛋白重组表达。

        5.质量控制

        - 无外源质粒DNA残留。

        - 转化效率超过107 cfu/μg pUC19 DNA

        6.使用方法

        1、在冰上解冻感受态细胞(-80℃保存)。

        2、将待转化DNA加入到100 μl感受态细胞中,轻弹管壁混匀(请勿振荡混匀),冰上静置30 min。

        3、42℃水浴热激45 sec后,立即置于冰上冷却2-3 min。

        4、加入900 μl SOC或LB培养基(不添加抗生素),37℃摇菌1 h(转速200 - 250 rpm),使菌复苏,抗性基因表达。

        5、将相应抗性的LB平板固体培养基在37℃培养箱中预热。

        6、5,000 rpm离心5 min,弃掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬,用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀,室温正放10 min。

        7、37℃培养箱中倒置培养12-16 h。

        7.注意事项

        1、感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用

        2、待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10。

        3、待转化DNA加入感受态细胞后,请勿用移液枪吹打,用枪头轻轻旋转即可。

        4、为确保最高效率转化,整个操作过程应保持低温,动作应轻缓。

         

        产品说明书:BL21(DE3)化学感受态细胞

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