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        XL10

        XL10 化学感受态细胞(CC201)

        货号 规格 价格
        CC201 100 μl × 10支 200
        100 μl × 20支 380

        1.产品介绍
        XL10是目前转化效率最高的感受态细胞,由Stratagene开发的特异性用于大质?;蛘涔罅硬镒蚬菇ㄎ目獾某陡惺芴赴?。XL10菌株为Hte(high transformation efficiency)基因型,HteStratagene开发的特异性提高感受态转化效率及大质粒转化能力的宿主菌基因型,已成功应用于40kd质粒的构建。[Δ(mcrA)183 Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173]赋予XL10缺失几乎所有已知的限制酶切系统;同时缺失核酸内切酶(endA),提高了质粒DNA的产量和质量;重组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA的稳定性;TetR, CamR赋予菌株四环素和氯霉素抗性;lacIqZΔM15的存在使XL10-Gold可用于蓝、白斑筛选。XL10感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率>2×109 cfu/μg DNA。

         

        2.产品组成

        Item Vol Transformation Efficiency
        XL10 Chemically Competent Cell 100 μl >2 × 109 cfu/μ

        3.贮藏条件

        本产品应置于-80℃储存,勿置于-20℃或液氮中保存

         

        4.质量控制

        - 无外源质粒DNA残留。

        - 转化效率超过2 × 109 cfu/μg pUC19 DNA

         

        5.使用方法

        1. XL10感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质?;蛄硬?/span>) 并用手拨打EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。

        2. 42℃水浴热激35秒(非常重要——Efficiency decreases sharply when cells are heat-pulsed for <30 seconds or for >40 seconds.),迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

        3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YTLB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

        4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YTLB培养基上。

        5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

         

        6.注意事项

        1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率?;烊胫柿;蛄硬锸庇η崛岵僮?。

        2. 混入质?;蛄硬锸庇η崛岵僮?。

        3. 转化高浓度的质?;蚋咝实牧硬锟上嘤跎僮钪沼糜谕堪宓木?。

        4. XL10菌株对 <40 µg/ml氯霉素有抗性,但对100 µg/ml氯霉素敏感。

        5.XL10感受态细胞采用常规转化方法,转化效率可达2×109 cfu/μg DNA;如果有更高要求,可尝试Stratagene公司推荐的标准protocol。

         

        产品说明书:XL10化学感受态细胞

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