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        TOP10

        TOP10 化学感受态细胞(CC401)

        货号 规格 价格
        CC401 100 μl×10支 180
        100 μl×20支 330

         

        1. 产品介绍

        TOP10菌株来源于MC1061菌株,是目前实验室最常用的感受态细胞之一,基因型与DH10B高度类似 (DH10BgalE15型,而TOP10galU)。TOP10生长速度快 (DH5α快,但比Mach1-T1生长速度慢),10小时可见克隆,recA1endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取??捎糜诠菇寺?,蓝白斑筛选等实验。TOP10感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率>5×108cfu/μg DNA。

        2. 产品组成

        Item Vol Transformation Efficiency
        TOP10 Chemically Competent Cell 100 μl 5 × 108 cfu/μg

         

        3. 贮藏条件

        本产品应置于-80储存,勿置于-20或液氮中保存

         

        4. 质量控制

        - 无外源质粒DNA残留。

        - 转化效率超过5 × 108 cfu/μg pUC19 DNA

         

        5. 使用方法

        1. TOP10感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质?;蛄硬?/span>) 并用手拨打EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。

        2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

        3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基 (2YTLB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。

        4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YTLB培养基上。

        5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少13 h。

         

        6. 注意事项

        1感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

        2. 混入质?;蛄硬锸庇η崛岵僮?。

        3. 转化高浓度的质?;蚋咝实牧硬锟上嘤跎僮钪沼糜谕堪宓木?。

         

        产品说明书:TOP10 化学感受态细胞

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